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羧酸酯酶(CarE)測試盒微量法

簡要描述:羧酸酯酶(CarE)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:B(2.25萬單位) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:2.25萬單位*5支 D-發(fā)酵管(枯草芽孢桿菌) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 肝湯 英文名稱:Liver Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 改良卵黃瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Mannitol-Egg-Yolk-Polymycin Agar Base,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2025-11-01
  • 訪  問  量:1588

詳細介紹

實驗方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:羧酸酯酶(CarE)測試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

產(chǎn)品貨號:BK-01S6546

產(chǎn)品分類:酯酶系列
商品介紹:

測定意義:

哺乳動物CarE,也稱脂族酯酶(aliesterase),廣泛分布于組織和器官,屬于絲水解酶家族。CarE催化含酯鍵、酰胺鍵和硫酯鍵的內(nèi)源性與外源性物質(zhì)水解,但不能催化水解乙酰及其類似物。CarE參與脂質(zhì)運輸和代謝,并且與多種藥物、環(huán)境毒物以及致癌物的解毒和代謝有關(guān),有機磷農(nóng)藥可結(jié)合并且抑制CarE活性。

測定原理:

CarE能催化乙酸-1-萘酯生成萘酯,固籃顯色;在450 nm光吸收增加速率,計算CarE活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、低溫離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

50g 聚乙烯聚吡咯烷酮 Polyvinylpolypyrrolidone(PVPP) 室溫干燥保存

50T 溶血性鏈球菌熒光PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10 μg Leptomycin B(出核轉(zhuǎn)運抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

500mL EBC- Lysis Buffer  EBC- Lysis Buffer  常溫保存

1.5mL 酵母tRNA溶液A(粗提)(5mg/mL) Yeast tRNA Solution -20℃保存

2 ug PinPoint Xa-2 PinPoint Xa-2 低溫運輸,-20℃保存

醛類中和劑管(帶棉簽)  10ml*20

1瓶 L7712細胞株 L7712 低溫運輸和保存

改良醇麥康凱瓊脂添加劑 Modified Sorbitol MacConkey Agar Additives 1ml*5支

10mL 過氧化氫 Catalase A型4℃保存;B型-20℃

500mL Standard Ringer’s Solution (un-buffered)  Standard Ringer’s Solution (un-buffered)  常溫保存

羧酸酯酶(CarE)測試盒微量法CRHR1/CRFR1  促上皮質(zhì)釋放激素受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-CY5  PE-CY5標記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1ml

ADAMTS8  整合素樣金屬蛋白與凝8型抗體 0.2ml

Lactoferrin  鐵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

HOMER2  HOMER2抗體 規(guī)格: 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標記的小鼠抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

phospho-P53(Thr81)  磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規(guī)格: 0.1ml

PPHLN1  脈周蛋白1抗體(胃抗原蛋白Ga50) 規(guī)格: 0.2ml

DDIT4L  DNA損傷誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄樣蛋白4抗體 規(guī)格: 0.2ml

FGFR1OP/FOP  成纖維細胞生因子受體1原基因伴侶蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

CD45/B220  白細胞共同抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

Ribonuclease Inhibitor  核糖核酸抑制因子1抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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