儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐藥細胞亞株)5×106cells/瓶×2毒胡蘿卜素(>95% (HPLC),BC)質量規(guī)格：>95% (HPLC),BCThapsigargin, from Thapsia garganica

PANC-1, 人胰腺癌細胞 肝癌細胞,Hep G2細胞 U-937(組織細胞瘤細胞)硫黃素 T(>75%,BS)質量規(guī)格：>75%,BSThioflavin T

小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3硫藤黃素(>95%,BC)質量規(guī)格：>95%,BCThiolutin from Streptomyces luteosporeus

LAMP1 Others Human 人 LAMP1 / CD107a 人細胞裂解液 (陽性對照) 硫堇(>90%,BS)質量規(guī)格：>90%,BSThionin

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6四丙基化銨(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)Tetrapropylammonium Iodide
Caki-1細胞，人腎透明細胞癌皮膚轉移細胞 綠猴猴脈絡膜-視網膜(內皮)細胞,RF/6A細胞 CL-0414PC-3M-IE8(人前列腺癌高轉移細胞株)5×106cells/瓶×2法羅培南鈉(標準品)質量規(guī)格：標準品用于含量測定Faropenem

CRT(人神經膠質瘤細胞) 5×106cells/瓶×2奧利司他質量規(guī)格：≥98.0%,BROrlistat(synthesis)

hMNC-PB-c pooledula-pure 人單核細胞，來自外周血，混合來源，超 人心臟微血管內皮細胞HCMEC立枯1(分析標準品,98%)質量規(guī)格：分析標準品,98%Tolclofos-methyl

GBC-SD, 人膽囊癌細胞殺蟲單(標準品)質量規(guī)格：分析標準品Thiosultap di

ERBB4 Others Human 人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 人細胞裂解液 (陽性對照) 綠草定(標準品)質量規(guī)格：分析標準品Triclopyr
TNF Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 TNF-alpha / TNFA / TNFSF1A / Cachectin 蛋白5-溴-2-脫氧胞苷5克

人臍帶靜脈平滑肌細胞 (HUVSMC)( 5×105 ) SKOV3/Taxol-25, 人卵巢癌紫杉醇耐藥細胞株 Human2,4-二羥基-6-... 2,4-Dihydroxy-6-methylbenzoic acid,97% 480-64-8 250MG 通用試劑

人男性正常細胞;Hs68L-半胱安醋言醋鹽;(R)-2-安基-3-炳醋言醋鹽 L-Cystqinq xy7nochloridq;L(+)-α-cMino-β-thiopropionic ccid xy7nochloridq;L(+)-cMino-α-Mqrccptopropionic ccid xy7nochloridq 7048-4-6

CD2 Others Rat 大鼠 CD2 人細胞裂解液 (陽性對照) 天青II曙紅100克

人輸尿管上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL9000-1-5阿拉伯樹膠Arabic gum
F0F1-ATP酶/ATP合成酶測試盒615小鼠癌瘤株;Ca761 小鼠成纖維細胞*培養(yǎng)基 100mL甘草酸Glycyrrhizic acid質量規(guī)格：UV>98%,BR

MN-h, 小鼠海馬神經元 Mouse甘草酸(標準品)Glycyrrhizic acid質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

EPHA2 Others Mouse 小鼠 EPHA2 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸單銨鹽(標準品)Glycyrrhizic acid ammonium salt質量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人胚腎二倍體細胞;CCC-HEK-1甘草酸單銨鹽Glycyrrhizic acid ammonium salt質量規(guī)格：UV>97%,無水物,BR

HA Others H7N9 甲型流感 H7N9 (A/Hangzhou/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘草酸二銨鹽（標準品）Diammonium Glycyrrhizate質量規(guī)格：UV≥98%，標準品

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